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      影響樣品分子的遷移速度的因素有哪些

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          毛細管電泳系統主要用于生物大分子(多肽、蛋白質)、多糖、中藥活性組份和其它天然產物的分析以及微量制備。儀器自動進樣并自動收集分離組分。配有先進的數據處理系統。
        毛細管電泳是一種在空芯的、極微小內徑的毛細管中進行的液-液相大、小分子的高效蛋白分離技術。毛細管兩端分別浸入緩沖液中,而緩沖液中分別插入連有高壓電源的電極,根據被分離物之間電荷和體積的不同,帶電荷分子朝相反極性的電極方向移動。又利用毛細管內壁上的電荷和應用的勢能而引起的電解質移動,毛細管內表面帶有硅羥基基團,當毛細管內充滿緩沖溶液時,毛細管壁上的硅羥基發生解離,生成氫離子溶解在溶液中,這樣就使毛細管壁上形成雙電層,管壁是負電荷層,溶液是正電荷層。在毛細管的兩端加上直流電場后,帶正電的溶液就會整體向負移動,形成了電滲流。無論是帶正電、帶負電或不帶電的粒子,都在電滲流的作用下,向陰極遷移,帶正電的,受到同方向的電場力作用,遷移最快,不帶電的遷移速度次之,帶負電的遷移速度最慢,(因為它受到與電滲流反方向的電場力作用),從而實現各蛋白組分的分離。
        在毛細管電泳中,樣品分子的遷移是有效電泳淌度和電滲流淌度的綜合表現,這時的淌度稱為表觀淌度。在多數的水溶液中,石英(或玻璃)毛細管表面因硅羥基解離會產生負的定域電荷,產生指向負極的電滲流。在毛細管中電滲速度可比電泳速度大一個數量級,所以能實現樣品組分同向泳動。正離子的運動方向和電滲和電泳一致,因此它應最先流出。中性分子與電滲流同速,隨電滲而行。負離子因其運動方向和電滲相反,在中性粒子之后流出。電滲流與pH的關系十分密切。電滲受Zeta電勢的影響,Zeta電勢由毛細管壁表面的電荷決定,而電荷又受到緩沖溶液的pH值影響,所以電滲流的值是緩沖溶液的pH值的函數,一般隨pH值的增大而增大,到中性或堿性時,其值會變得很大。此外,任何影響管壁上解離的因素,如毛細管洗滌過程、電泳緩沖液組成、粘度、溫度等都會影響或改變電滲流。電磁場以及許多能與毛細管表面作用的物質如表面活性劑、蛋白質等,都可以對電滲流產生很大影響。




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